Flow cytometric characterization of the hemocytes of blood cockles Anadara broughtonii (Schrenck, 1867), Anadara kagoshimensis (Tocunaga, 1906), and Tegillarca granosa (Linnaeus, 1758
- Abstract
- 해양 이매패류는 체액성 인자 (humoral factor)들과 혈구 (hemocyte)로 구성 된 선천 면역 시스템 (innate immune system)을 보유하고 있으며, 혈구는 혈림프액 (hemolymph) 안에서 모든 조직세포 사이를 자유롭게 순환하며 생리적 안정상태 를 유지하기 위해 다양한 반응을 보인다. 돌조개 과의 Anadara와 Tegillarca 종에 속하는 blood cockle들은 일반적인 이매패류들이 보유하고 있는 백혈구 외에도 헤 모글로빈을 함유한 적혈구를 보유하고 있는 것이 특징이다. Blood cockle의 면역 시스템을 이해하기 위해서는 혈구 유형을 분류하고 세포별 면역 기능을 구명하 는 것이 우선이나, 현재까지 blood cockle의 혈구세포 종류와 기능에 대한 연구는 미흡한 실정이다. 이 연구에서는 우리나라에 서식하는 대표적인 blood cockle인 피 조개 (Anadara boughtonii), 새꼬막 (A. kagoshimensis), 꼬막 (Tegillarca granosa)을 대 상으로 혈구세포의 형태와 기능을 유세포분석기 (flow cytometry)를 이용하여 비교 분석하였다. 세 종 모두 세포의 형태와 면역기능에 따라 erythrocytes type-Ⅰ (erythrocytes-Ⅰ), erythrocytes type-Ⅱ (erythrocytes-Ⅱ), granulocytes, hyalinocytes, 및 blastlike cells의 5가지 유형으로 동일하게 분류되었다. Erythrocytes는 혈림프액 내 혈구 세포 중 90% 이상을 차지하는 가장 많은 세포로 세포질 안에 많은 과립 (granules)을 가지고 있는 원반 형태였다. Erythrocytes는 세포의 크기와 면역 능력 에 따라 erythrocytes-Ⅰ와 erythrocytes-Ⅱ의 2가지로 유형으로 분류되었다. Erythrocytes-Ⅱ는 혈구세포 중 가장 크기가 컸으며, 세포질 내 많은 lysosome을 보 유하고 혈구 세포들 중 가장 활발한 세포산화 능력 (oxidative capacity)을 보이는 등 erythrocytes의 세포성 면역능력을 보유하고 있는 것이 확인되었다. 그러나 erythrocytes-Ⅰ와 erythrocytes-Ⅱ는 식세포 작용 (phagocytosis)에는 관여를 하지 않았 다. Granulocytes는 긴 위족 (pseudopodia)과 세포질 내 많은 과립들이 있는 것이 특징이며, 혈구세포들 중 가장 많은 lysosome의 양과 가장 활발한 식세포 능력을 보였으며 erythrocytes-Ⅱ 다음으로 활발한 세포산화 능력을 보였다. Hyalinocytes는 granulocytes 보다는 크기가 작은 구형의 세포로 세포질 내 과립이 없었다. Hyalinocytes는 세포질 내 일정 양의 lysosome을 보유하고 있으며 granulocytes 보 다는 낮은 식세포 능력과 세포산화 능력이 확인되었다. Blast-like cells은 혈구세포 들 중 가장 작은 크기와 얇은 세포질을 가진 세포로 식세포 능력과 세포산화 능 력이 거의 없었다. 이번 연구를 통해 피조개, 새꼬막, 꼬막 3종의 혈구세포는 5가 지 유형으로 분류되었으며, 그 중 erythrocytes와 granulocytes가 주된 면역세포인 것을 확인되었다.
- Author(s)
- Kim, Jeong Hwa
- Issued Date
- 2020
- Awarded Date
- 2020. 8
- Type
- Dissertation
- URI
- http://dcoll.jejunu.ac.kr/common/orgView/000000009670
- Alternative Author(s)
- 김정화
- Affiliation
- 제주대학교 대학원
- Department
- 대학원 해양생명과학과
- Advisor
- 최강식
- Table Of Contents
- 국문요약 2
LIST OF FIGURES 4
LIST OF TABLES 5
1. INTRODUCTION 6
2. MATERIALS AND METHODS . 9
2.1. Sampling effort . 9
2.2. Hemolymph collection . 12
2.3. Flow cytometric analyses . 12
2.3.1. Hemocyte type and count 12
2.3.2. Intracellular lysosome quantification 12
2.3.3. Phagocytosis capacity 13
2.3.4. Oxidative capacity . 13
2.4. Microscopic observation . 14
2.4.1. Light microscopy . 14
2.4.2. Scanning electron microscopy (SEM) . 14
2.5. Statistics 15
3. RESULTS . 16
3.1. Hemoctyte types . 15
3.2. Morphology of the hemocytes 19
3.3. THC and percentage of each hemocyte types 19
3.4. Immunological activities 22
3.4.1 Lysosomal contents 22
3.4.2 Phagocytosis capacity . 23
3.4.3 Oxidative capacity 25
4. DISCUSSION . 27
5. CONCLUSION . 32
REFERENCES . 34
- Degree
- Master
- Publisher
- 제주대학교 대학원
- Citation
- Kim, Jeong Hwa. (2020). Flow cytometric characterization of the hemocytes of blood cockles Anadara broughtonii (Schrenck, 1867), Anadara kagoshimensis (Tocunaga, 1906), and Tegillarca granosa (Linnaeus, 1758
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